PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮，可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEIMAX，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高，可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達細胞體系，實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度。而且與大多數(shù)細胞轉(zhuǎn)染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本（部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本）。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！有哪些品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑呢?聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝操作說明清晰

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙?；?；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！實驗室用途PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝可支持工藝開發(fā)美國Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣？

接種細胞：轉(zhuǎn)染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?有誰用過Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑？

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調(diào)pH值到7.4，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?想購買24765-1在哪里可以買？非脂質(zhì)體PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

哪里可以買到23966-1？聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝操作說明清晰

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝操作說明清晰

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